بررسي ميزان بيان و عملكرد ماتريكس متالوپروتئيناز غشايي 2 در سلول¬هاي ميلومايي و طراحي مهاركننده آن با استفاده از روش¬هاي مدل¬سازي مولكولي

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

پژوهشي

علي¬رغم توسعه داروهاي جديد، مالتيپل ميلوما (MM) به عنوان يكي از سرطان¬هاي غيرقابل درمان باقي مانده است. بنابراين شناسايي مولكول¬هايي كه نقش مهمي در پيشرفت و تهاجم سلول¬هاي MM دارند، ضروري به نظر مي رسد. نقش ماتريكس متالوپروتئينازهاي غشايي (MT-MMPs) در متاستاز برخي از تومورهاي جامد نشان داده شده است. هرچند، نقش آن¬ها در تهاجم و پيشرفت MM تا كنون شناسايي نشده است. از طرف ديگر، با وجود اين¬كه استفاده از مهاركننده¬هاي¬ متالوپروتئينازها (MMP) در كارآزمايي¬هاي باليني با شكست مواجه شده است، آن¬ها همواره به عنوان اهداف مناسب براي درمان تومور در نظر گرفته شده اند. به همين دليل، تلاش براي طراحي و توسعه مهاركننده¬هايي با قابليت و اختصاصيت بيشتر براي يك MMP، توسط روش¬هاي نوين طراحي دارو مي تواند مفيد و موثر باشد. روش¬ها در اين مطالعه، ابتدا بيان 6 عضو MT-MMP در رده¬هاي سلولMM، B، سلول¬هاي تك هسته¬اي، چند هسته¬اي و لنفوسيت¬هاي B نرمال با روش RT-PCR غربال¬گري شد. سپس با استفاده از ستون¬هاي MACS، لنفوسيت¬هاي B نرمال (CD19+) و پلاسماسل¬هاي بدخيم (CD19-/CD138+) از آسپيره مغز استخوان بيماران MM جداسازي شدند و بيان MT2-MMP در اين سلول¬ها توسط RT-qPCR، فلوسايتومتري و ICC تعيين شد. بيان MT2-MMP در بيوپسي بيماران MM و افراد سالم توسط IHC بررسي شد. ناك داون MT2-MMP با روش siRNA انجام و عملكرد آن در تهاجم و متاستاز سلول¬هاي MM با آزمايش¬هاي سنجش چسبندگي، تهاجم، مهاجرت و تكثير سلولي بررسي شد. همچنين نقش MT2-MMP در رشد سلول¬هاي MM در موش¬هاي nude آزمايش شد. علاوه بر اين، با استفاده از روش-هاي مدل¬سازي مولكولي پيشرفته، مهاركننده¬هاي موثري در برابر MT2-MMP طراحي شد. به طوري¬كه ابتدا ساختار سه بعدي MT2-MMP پيش بيني و سپس مهاركننده¬ها در برابر 2 ناحيه از دومن كاتاليتيك MT2-MMP (جايگاه فعال و MT-LOOP) از طريق داكينگ مولكولي، QM/MM و شبيه-سازي ديناميك مولكولي در بين مجموعه¬اي از تركيبات موجود در 4 كتابخانه (Anahyticon، IBS، Maybridge و Drugbank) شناسايي شدند. يافته‌ها داده¬هاي ما افزايش بيان MT2-MMP در رده¬هاي سلول MM و پلاسماسل¬هاي بدخيم را نشان دادند. به طوري¬كه MT2-MMP در 100 درصد از بيوپسي مغزاستخوان بيماران MM (هيچ¬كدام از بيوپسي¬هاي افراد سالم) بيان شد. همچنين، مهار MT2-MMP در سلول¬هاي U266 باعث كاهش چسبندگي- تهاجم- مهاجرت، كاهش فعال¬سازي pro-MMP2 و pro-MMP9 و كاهش تكثير سه بعدي اين سلول¬ها شد. به طور جالب توجه، مهار MT2-MMP منجر به كاهش معني¬دار رشد سلول¬هاي MM در موش¬هاي nude شد. علاوه بر اين، از بين مهاركننده¬هاي پيشنهادي كه خصوصيات فارماكوديناميك آن¬ها در محدوده قابل قبول براي انسان بودند، تركيبات structures.722 (دوبوتامين) و M2 به عنوان دو كانديد مناسب براي مهار MT2-MMP معرفي شدند. نتيجه گيري MT2-MMP در سلول¬هاي MM به ميزان زيادي بيان مي¬شود و نقش مهمي در چسبندگي، تهاجم و مهاجرت و تكثير اين سلول¬ها در in vitro و in vivo بازي مي¬كند. بنابراين، MT2-MMP مي¬تواند يك هدف مناسب براي درمان MM باشد. كليد واژه ها كلمات كليدي: مالتيپل ميلوما، ماتريكس متالوپروتئيناز، MT2-MMP، ديناميك مولكولي، MT-LOOP

81773

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

پزشكي

دانشگاه علوم پزشکي کردستان

علي جليلي