شناسايي ژن‌هاي القاء شده در اثر نانوذرات اكسيد روي در كشت سلولي پروانش به روش cDNA-AFLP

دانشگاه ولي عصر(عج) رفسنجان

كارشناسي ارشد

گياه دارويي پروانش به علت وجود آلكالوئيدهاي ارزشمند بعنوان يك گياه دارويي بسيار مهم معرفي شده است. ميزان توليد بسيار كم اين آلكالوئيدها در گياه پروانش و دشوار و چند مرحله¬اي بودن مسير سنتز آن¬ها و افزايش روزافزون تقاضا براي توليد اين آلكالوئيدها موجب تشويق محققان به استفاده از روش¬هاي جديد سنتز و مطالعه¬ي راه¬هاي بيوتكنولوژيكي براي توليد ارزان¬تر اين داروهاي گياهي شده است. اين روش¬ها نياز به شناسايي دقيق ژن¬ها و عوامل موثر بر افزايش توليد اين متابوليت¬ها دارد. در اين پژوهش از روش cDNA-AFLP براي شناسايي ژن¬هايي از گياه پروانش كه تحت تاثير اليسيتور نانواكسيد روي قرار گرفتند، استفاده شده است. بدين منظور ابتدا كالوس¬هاي تيمار شده با اليسيتور نانو¬اكسيد روي (با غلظت 25ميلي گرم بر ليتر) در زمان¬هاي 0، 6، 12، 24، 48 و 120 ساعت نمونه¬گيري شدند، سپس آزمايش cDNA-AFLPبر روي آن¬ها صورت گرفت. از بين تقريباً 1300 باندي كه مشاهده شدند. تنها 91 باند (TDF) تحت تنش نانو¬اكسيد روي تغيير كرده بودند كه از بين آن¬ها فقط 41 TDF كه مشكل اسميري نداشتند توالي¬يابي شدند و در نهايت پروتئين¬هاي مرتبط با 11 TDF كه در توالي¬يابي خوانش موفقي داشتند در فرآيند¬هايي همچون بيوسنتز بنزوفنانتريدين، توليد بربرين و سنگرينين، هورمون گياهي ايندول-3-استات از L-تريپتوفان، در فعاليت آنزيم¬هايي همچون كيناز، پروتئين سرين/ترئونين كيناز، انتقال دهنده يوبيكوئيتين، مونو¬كسيژناز، اكسيدوردوكتاز و همچنين در بيوسنتز سكولوگانين كه بخشي از مسير بيوسنتز آلكالوئيدي است، نقش عملكردي دارند.

57190

دانشگاه وليعصر رفسنجان

خليل ملك زاده-سيد رسول صحافي

بيوتكنولوژي

محسن محمود نيا