شناسايي گونه هاي تريكودرما جدا شده از باغ هاي گردوي استان آذربايجان شرقي..

دانشگاه ولي عصر(عج)

كارشناسي ارشد

به منظور شناسايي گونه‌هاي تريكودرما در خاك و قسمت¬هاي هوايي درختان گردو و انتخاب جدايه¬هاي موثر در كنترل بيولوژيكي بيماري آنتراكنوز گردو، نمونه‌برداري طي سال‌هاي 1392-1393 از باغ‌هاي گردو‌، در مناطق مختلف استان آذربايجان شرقي به‌صورت تصادفي از عمق صفر تا 40 سانتي‌متري خاك، ناحيه‌ي ريزوسفر و قسمتهاي هوايي انجام شد. جداسازي جدايه¬ها با استفاده از محيط‌كشت انتخابي (TSM) انجام گرفت. در مجموع تعداد 312 جدايه‌ي تريكودرما از 200 نمونه‌ي خاك و قسمتهاي هوايي جداسازي گرديد. براي شناسايي جدايه‌هاي تريكودرما، ويژگي‌هاي ريخت-شناسي و مولكولي جدايه¬ها مورد بررسي قرار گرفت. شناسايي مورفولوژيكي جدايه¬ها بر¬اساس ويژگي‌هاي ماكرومورفولوژيك مانند نحوه¬ي رشد و شكل پرگنه، وجود يا عدم وجود جوش‌، رنگدانه و نحوه¬ي اسپورزايي و ويژگي‌هاي ميكرومورفولوژيكي مانند شكل و نحوه¬ي انشعاب كنيديفور، شكل و اندازه¬ي فياليد، كنيديوم و كلاميدوسپور در محيط‌كشت‌هاي PDA و CMD با استفاده از كليدهاي معتبر انجام گرفت و به¬منظور شناسايي بر پايه¬ي مشخصه¬هاي مولكولي، ناحيه¬ي ITS از DNA ريبوزومي با استفاده از جفت آغازگرهاي ITS1f-ITS4 تكثير و محصول 650 جفت¬بازي در همه¬ي جدايه-هاي نماينده تكثير شد. همچنين از تعيين توالي ژن tef1 نيز براي تاييد شناسايي مورفولوژيكي و همچنين مقايسه با ناحيه¬ي ITS استفاده شد. با داشتن توالي ITS و tef1، جدايه¬ها با استفاده از پايگاه بانك ژن NCBI و برنامه¬يTrichOKEY 2.0 شناسايي شدند. جدايه¬هاي شناسايي شده به هفت گونه¬ي Trichoderma harzianum، T. pleuroticola، T. virens، T. atrobrunneum ,T. citrinoviride ,T. ghanensem و T. longibrachiatum تعلق دارند. بيش از 70 درصد جدايه¬هاي تريكودرما به گونه¬هاي T. harzianum و T. virens تعلق دارند. T. harzianum گونه¬ي غالب خاك باغ‌هاي گردوي استان آذربايجان¬شرقي معرفي گرديد. اثر آنتاگونيستي سه گونه T.harzianum، T.virens وT.ghanense بر روي قارچ Ophiognomonia leptostyla به صورت در شرايط آزمايشگاه و گلخانه بررسي شد. نتايج حاصل از كشت بيمارگر آنتراكنوز روي محيط كشت (PCDA) حاوي 30 درصد از عصاره گونه هاي تريكودرما و مايه زني برگ نهال هاي يكساله گردو با سوسپانسيون اسپورml-1 105 از قارچ عامل آنتراكنوز و سوسپانسيون اسپور ml-1107×6 از گونه هاي تريكودرما نشان داد كه گونه T.harzianum نسبت به ساير گونه ها از اثر بازدارندگي بيشتري برخوردار است. با توجه به نتايج به دست آمده و نقش مثبت گونه هاي تريكودرما در كنترل آنتراكنوز گردو، استفاده از اين ميكروارگانيسمها مي¬تواند به عنوان بخشي از استراتژي مديريت كنترل بيماريهاي درختان گردو پيشنهاد ميشود.

50557

دانشگاه وليعصر رفسنجان

بيماري شناسي گياهي

حسين علايي