شناسايي و تعيين پراكنندگي ويروس هاي عامل موزاييك در مزارع و گلخانه هاي گوجه فرنگي شهرستان يزد

دانششگاه ولي عصر ﴿عج﴾

كارشناسي ارشد

گوجه‌فرنگي (LycopersicumesculentumMill.) يكيازسبزيجاتمهمدرايران و بسياريازكشور¬‌ها است.ويروس-هاازجملهبيمار¬گر¬هاييهستندكه باعث ايجاد خسارت در اين محصول مي‌شوند. در اين پژوهش به‌منظوربررسيميزانپراكندگي ويروس¬هاي عامل موزاييكو بررسي ويژگي¬هاي ويروس غالبدرمزارع و گلخانه‌هايشهرستانيزد،نمونه¬برداري¬هاييطيفصل زراعي90تا 91 انجامشد. درطيايننمونه‌برداري 451نمونه‌‌يبرگيباعلائم موزاييك ازنقاطعمده¬يكشت گوجه‌فرنگيدرشهرستانيزدجمع¬آوريشد.نمونه¬هاي فوق با استفاده از روش ACP-ELISA وDAS-ELISAو با آنتي-بادياختصاصيPotato virus Y(PVY)، Cucumber mosaic virus (CMV)، Tomato mosaic virus (ToMV) وArabis mosaic virus (ArMV) موردبررسيقرارگرفتند. در اين پژوهش درصد آلودگي نمونه‌هاي جمع¬آوري شده به ويروس¬هاي CMV، PVY، ArMV و ToMV به ترتيب 3/11%، 6/20%، 6/2% و 5/13% و بيش‌ترين درصد آلودگي متعلق به ويروسPVYبود. براي تعيين سويه‌ي يك جدايه¬ي انتخابي ويروس (T5) ابتدا آزمون تعيين دامنه¬ي ميزباني انجام شد و ويروس به تعدادي از گياهان خانواده¬ي Solanaceae، Chenopodiaceae، Cucurbitaceae و Leguminoseae مايه‌زني شد. در اين آزمون، جدايه¬ي ويروس در باقلا علائم لكه موضعي و درگياهان سيب‌زميني، فلفل دلمه¬اي، باقلا و توتون سيستميك شد. براي تعيين سويه¬ي جدايه¬ي T5، پس از استخراج RNAي كل از نمونه‌ها، با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي PVY نواحي مختلف CP، NIb و P1 تكثير شد. با آغازگرهاي M4T/Sprimer، P1/P2، CPf/CPr به ترتيب قطعات 1700، 837، 824 جفت بازي تكثير شد. براي تشخيص سويه¬ي PVY از جفت آغازگرهاي اختصاصي سويه به نام‌هاي CF/OR، NF/NR، OF/OR و NF/OR استفاده شد. با جفت آغازگرهاي OF/OR و OR/NF دو قطعه¬ي 609 جفت بازي تكثير شد. در آزمون RFLP محصول PCR حاصل از تكثير ناحيه¬ي P1 تحت تاثير آنزيم برشي HincII قرار گرفت كه دو قطعه¬ي حدود 400 جفت بازي ايجاد شد. در نهايت، توالي P1، CP و NIb ويروس با ساير توالي¬هاي موجود در بانك ژن مورد بررسي قرار گرفت. . با توجه به نتايج جدايه¬ي T5 مورد بررسي متعلق به گروهNTN است.

47494

دانشگاه وليعصر رفسنجان

سيد عليرضا اسماعيل زاده ،الهام محمدي

گياهپزشكي.بيماري شناسي گياهي

ثمين السادات حسيني فرهنگي