بررسي اثر نانو پليمر كايتوزان با DNA واكسن كدكننده ژن oipA هليكوباكتر پايلوري در توليد سايتوكاين¬هاي IFN-γ و IL-4 در مدل موشي Balb/c

رشت

ميكروب شناسي

مقدمه: هليكوباكتر پايلوري يك باكتري گرم منفي بوده كه در لايه مخاطي معده انسان تكثير مي¬شود و بيش از 90% از موارد سرطان معده مربوط به عفونت مزمن ناشي از اين باكتري مي¬باشد. نتايج مطالعات در انسان نشان مي¬دهد كه پروتئين OipA اين باكتري مي¬تواند به تنهايي در ايجاد سرطان معده نقش ايفا كند. امروزه براي افزايش كارايي واكسن¬هاي ژني از نانو حامل-هايي همچون كايتوزان استفاده مي¬شود. كايتوزان كه پليمري كاتيوني است يكي از مناسب¬ترين حامل¬هاي غير ويروسي براي رسانش ژن مي¬باشد و به دليل بار سطحي مثبت، با DNA كه بار سطحي منفي دارد واكنش داده، آن را از تخريب نوكلئازي حفاظت نموده و در نتيجه بيان آنتي¬ژن مورد نظر را افزايش مي¬دهد. هدف: هدف از اين مطالعه بهينه¬سازي عملكرد يك واكسن ژني كانديد براي هليكوباكتر پايلوري با بهره¬گيري از سيستم دليوري ژن بر مبناي يك ادجوانت زيست تخريب¬پذير با عنوان كايتوزان و بررسي برخي پاسخ¬هاي ايمني در موشي بود. مواد و روش¬ها: پلاسميد واجد ژن oipA پس از كشت با كيت ميني پرب استخراج شد و بعد از بارگذاري با نانوذره كايتوزان و تهيه پلي¬پلكس، تست¬هاي تاييدي به منظور ارزيابي كارايي انكپسولاسيون سيستم دليوري ژن بر مبناي كايتوزان صورت گرفت. سپس پلاسميد مذكور با استفاده از كيت استخراج گيگا عاري از اندوتوكسين در حجم بالا استخراج گرديد. DNA حاصله با كايتوزان پوشش¬دار شد و به گروه¬هاي موشي تزريق گرديد. در نهايت به منظور ارزيابي پاسخ¬هاي ايمونولوژيك در مدل¬هاي موشي اقدام به جداسازي لنفوسيت¬ها از سلول¬هاي طحالي شد و ميزان توليد سايتوكاين¬هاي IFN-γ و IL-4 با استفاده از روش فلئوراسپات مورد ارزيابي قرار گرفت. نتايج: در گروه¬ موش¬هاي دريافت¬كننده واكسن ژني انكپسوله شده با كايتوزان نسبت به گروه¬هاي كنترل پس از ارزيابي ايمني، ميزان ترشح بيشتري از هر دو سايتوكاين IFN-γو IL-4 مشاهده گرديد. بحث و نتيجه¬گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه DNA واكسن كدكننده ژن oipA هليكوباكتر پايلوري در كمپلكس با نانوذره كايتوزان هم به عنوان سيستمي براي رسانش ژن و هم به عنوان يك ادجوانت در مقايسه با واكسن تنها پاسخ¬هاي ايمني بيشتري را سبب مي¬گردد.

3338

دانشكده پزشكي

دانشگاه علوم پزشكي گيلان

مجتهدي، علي Mojtahedi, Ali , عطركار روشن، زهرا Atrkar-roushan، Zahra

شناگري، محمد , ابوطالب، احسان