بررسي اثر مهار كننده تريپسين تخليص شده از سيب زميني شيرين [Ipomoea batatas (L.) Lam ] بر بقا و و بيان ژن CD-95 در سلولهاي سرطان معده رده MKN-45

لنگرود

زيست فناوري پزشكي

چكيده مقدمه: سرطان معده از شايع ترين سرطان ها در دنيا و نيز در ايران محسوب مي شود. به دليل هزينه بالا و عوارض روشهاي شيمي درماني، محققان به دنبال يافتن داروهاي كم هزينه و با منشأ گياهي مي باشند. سيب زميني شيرين داراي پروتئن مهاركننده تريپسين (TI)، است كه در اين مطالعه براي اولين بار اثر پروتئين TI تخليص شده از سيب زميني شيرين بر رشد و بيان ژنهاي دخيل در آپوپتوز در سلولهاي سرطان معده رده MKN-45 مورد بررسي قرار گرفت. روش كار: به منظور تخليص مهاركننده تريپسين، پروتئين هاي عصاره آبي سيب زميني شيرين با استفاده از نمك رسوب داده شد و به جهت خالص سازي بيشتر پس از دياليز از روش كروماتوگرافي تعويض يوني استفاده گرديد. به منظور تأييد هويت پروتئين SDS-PAGE انجام شد. فعاليت مهاري پروتئين توسط روش Laskowski سنجيده شد. پس از كشت سلولهاي MKN-45، و تيمار با TI، بررسي ميزان تكثير با تست MTT انجام و نوع مرگ ايجاد شده، توسط فلوسايتومتري بررسي شد. مطالعه بيان ژنهاي دخيل در آپوپتوز نيز از طريق تكنيك Real- Time PCR صورت گرفت. يافته ها: پس از تأييد هويت پروتئين، بر اساس نتايج تست MTT، IC50 در 24 و 48 ساعت به ترتيب 100 و200 ميكروگرم بر ميلي ليتر برآورد شد. بررسي فلوسايتومتري، مرگ آپوپتوزي را تاييد نمود. همچنين به دنبال تيمار سلولها به مدت 24 و 48 ساعت، بيان ژنهاي Fas، Bax وp53 افزايش و بيان ژن Bcl-2 كاهش يافت. نتيجه گيري: مهاركننده تريپسين استخراج شده از سيب زميني شيرين توانست تكثير سلولهاي سرطان معده را با الگويي وابسته به دوز و زمان مهار كند. همچنين اين پروتئين قادر به القاي مرگ آپوپتوزي از طريق هر دو مسير خارج و داخل سلولي مي باشد. بنابراين با توجه به هزينه اندك، استخراج آسان و پس از بررسي هاي بيشتر، مي توان مهاركننده تريپسين را بعنوان كانديداي مناسبي در درمان سرطان معده مورد توجه قرار داد. كلمات كليدي: مهاركننده تريپسين ، آپوپتوز، CD-95 .

3330

پيراپزشكي شرق گيلان

علوم پزشكي گيلان

نيكوكار، ايرج , اميدي، مريم

كبيري، آزاده