بررسي اثر كايمر آپتامر نوكلئولين-miRNA let-7d بر بيان Janus Kinase در سرطان معده رده سلولي MKN-45

لنگرود

مقدمه: سرطان معده يكي از شايع¬ترين سرطان¬هاي جهان و همچنين ايران است. هزينه¬ها و عوارض جانبي روش-هاي درماني رايج، محققين را به يافتن روش¬هاي درماني نوين علاقه¬مند مي¬كند. miRNAها از جمله عوامل تشخيصي و درماني بالقوه¬اي هستند كه اخيراً مورد توجه ويژه قرار گرفته¬اند. اين عوامل اليگونوكلئوتيدي از طريق مسيرهاي متابوليزمي مختلفي بر رشد و تكثير سلول¬هاي سرطاني تأثيرگذارند. در اين مطالعه، مسير متابوليزمي كه تحت تأثير كايمري متشكل از آپتامر نوكلئولين (NCL Aptamer) و miRNA let-7d قرار مي¬گيرد، بررسي شده است. هدف اين مطالعه دارورساني هدفمند let-7d به سلول¬هاي سرطان معده رده سلولي MKN-45 توسط آپتامر هدف گيرنده پروتئين نوكلئولين سطحي و بررسي اثر درماني اين ماكرومولكول از طريق سنجش تغييرات بيان و فعاليت آنزيم JAK2 است. روش¬كار: كايمر مورد نظر با توجه به توالي¬هاي مربوط به آپتامر AS1411 و miRNA let-7d طراحي و ساخته شد. با كمك الكتروفورز ژل پلي¬آكريل¬آميد شكل¬گيري كايمر NCL Aptamer-miRNA let-7d تأييد شد. سلول¬هاي سرطاني MKN-45 (داراي نوكلئولين سطحي زياد) و فيبروبلاستي HDF (فاقد نوكلئولين سطحي) در شرايط بهينه كشت شدند و پس از تيمار با گروه¬هاي مختلف در دو تست 24 و 48 ساعت بررسي شدند. به منظور بررسي تغييرات بيان ژن JAK2 از تكنيك Real Time PCR استفاده شد و سنجش تغييرات فعاليت اين آنزيم توسط تكنيك ELISA انجام شد. نتايج: كايمر NCL Aptamer-miRNA let-7d موجب كاهش ميزان رونوشت ژن JAK2 شد كه عمده اثر كاهشي آن توسط بخش let-7d اعمال گرديد. براساس نتايج مربوط به بررسي فعاليت پروتئين JAK2، miRNA let-7d و آپتامر به¬تنهايي در كاهش فسفريلاسيون اين آنزيم نقش دارند و تركيب اين دو ماكرومولكول به¬صورت كايمر، داراي اثري سينرژيك در كاهش فسفريلاسيون JAK2 بود. نتيجه¬گيري: با توجه به مطالعه حاضر مي¬توان JAK2 را به عنوان يكي از اهداف miRNA let-7d معرفي كرد و نتيجه گرفت كه let-7d از طريق تنظيم منفي اين پروتوانكوژن، موجب بروز اثرات ضد توموري در سلول¬هاي سرطاني MKN-45 مي¬شود. همچنين، آپتامر نوكلئولين تا حدودي موجب كاهش فعاليت آنزيم JAK2 از طريق كاهش فسفريلاسيون آن مي¬گردد. اين يژگي¬ها در كنار تحوبل اختصاصي دارو، اين كايمر را به عنوان يك كانديداي درماني مناسب در سرطان معده مطرح مي¬كند. كلمات كليدي: آپتامر، let-7d، MKN-45، JAK2

31377

علوم پزشكي گيلان