بررسي پروفايل ژنتيكي و وضعيت توليد ESBL در سويه¬هاي كلبسيلا پنومونيه جداشده از بيماران بستري در بيمارستان رازي در سال 1395

رشت

ميكروب شناسي

كلبسيلا پنومونيه يكي از اعضاي جنس كلبسيلا از خانواده انتروباكترياسه بوده و مسئول بخش مهمي از عفونت¬هاي بيمارستاني است. به دليل استفاده بي رويه از آنتي¬بيوتيك¬ها، تعداد سويه¬هاي مقاوم به چند دارو به طور قابل توجهي در حال افزايش است. يكي از مكانيسم¬هاي مقاومت آنتي¬بيوتيكي در كلبسيلا پنومونيه، توليد بتالاكتامازهاي وسيع¬الطيف (ESBL) مي¬باشد. از بين روش¬هاي بر پايه PCR، RAPD يك روش سريع براي توليد پروفايل DNA مي¬باشد كه تنوع و گوناگوني ژنتيكي در ارگانيسم¬هاي توليدكننده¬ي ESBL مختلف را نشان داده كه با پاتوژنز، بيان ژن¬هاي مربوط به مقاومت آنتي¬بيوتيكي و پاسخ متفاوت به درمان در ارتباط مي¬باشد. تاكنون هيچ¬گونه اطلاعاتي بر اساس مشخصات ژنتيكي به وسيله RAPD و پروفايل پلاسميد از ايزوله¬هاي باليني كلبسيلا پنومونيه در شمال ايران گزارش نشده است و هدف از اين مطالعه آناليز و تجزيه و تحليل رابطه بين اپيدميولوژي و مشخصات ژنتيكي آن¬ها است. مواد و روش¬ها 60 سويه كلبسيلا پنومونيه از بيماران بستري در بخش¬هاي مختلف بيمارستان رازي جداسازي شد و تست¬هاي حساسيت آنتي¬بيوتيكي نسبت به 20 آنتي¬بيوتيك طبق جدول CLSI و با استفاده از روش انتشار ديسك صورت گرفت. كليه سويه¬ها براي تعيين بتالاكتاماز¬هاي وسيع¬الطيف با روش دابل ديسك مورد ارزيابي قرار گرفتند. به منظور تعيين رابطه كلونال و تنوع ژنتيكي، واكنش RAPD-PCR با استفاده از پرايمر RAPD-7 انجام شد. همچنين پروفايل پلاسميدي سويه¬ها با مقايسه فاژ لامبدا تعيين شد. نتايج طبق آزمون Chi Square Test و آزمون دقيق فيشردر سويه¬هاي كلبسيلا پنومونيه جدا شده از نمونه¬هاي مختلف، بيشترين ميزان مقاومت نسبت به آمپي¬سيلين، آموكسي¬سيلين و اگزاسيلين بود. به عبارتي همه سويه¬ها به اين آنتي¬بيوتيك¬ها مقاوم بودند وكمترين ميزان مقاومت به ايمي¬پنم ديده شد. 27 سويه كلبسيلا پنومونيه مولد ESBL بودند و اين سويه¬ها در مقايسه با سويه¬هاي فاقد ESBL مقاومت بيشتري نسبت به آنتي¬بيوتيك¬هاي مورد بررسي نشان دادند. از تجزيه و تحليل دندروگرام 5 كلاستر با درصد شباهت 80 به دست آمد كه نشان دهنده شباهت سويه¬هاي مورد مطالعه در بيمارستان بود. 20 سويه از 27 سويه مولد ESBL در كلاستر R1 قرار گرفتند. قدرت تفكيك 8/0 محاسبه شد كه نشان دهنده هتروژنيسيته سويه-هاي كلبسيلا پنومونيه مورد مطالعه است. نتيجه¬گيري در مطالعه حاضر نشان داده شد كه سويه¬هاي مولد ESBL داراي شباهت ژنتيكي و سويه¬هاي فاقد ESBL داراي تنوع ژنوتايپي بودند. با توجه به شباهت 80 درصدي سويه¬ها، احتمالاً اين سويه¬ها داراي منشأ مشترك بوده كه بيانگر انتقال آن¬ها از يك كلون منحصر به فرد در ICU مي¬باشد

29738

دانشكده پزشكي

دانشگاه علوم پزشكي گيلان

هدايتي چكوسري، مجتبي Hedayati, Mojtaba , عطركار روشن، زهرا Atrkar Roushan, Zahra

مجتهدي، علي