عنوان
تشخيص و جداسازي سلولهاي توموري گردشي در خون از طريق سيستم اسپايتگ و اسپايكچر با استفاده از آدنوويروس مهندسي شده و ميكرودانه مغناظيسي
نويسنده اصلي
گلي، صادق
محل تحصيل
اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان
رشته تحصيلي
مهندسي پزشكي (بيومواد)
مقطع تحصيلي
دكتري
چكيده
سلولهاي توموري گردشي (CTCs) از جمله زيست نشانگرهاي كليدي در تشخيص، پيش آگهي و پايش برخط درمان سرطان به شمار ميروند.
با اين حال، كميابي اين سلولها و وابستگي روشهاي رايج به نشانگرهاي سطحي، كارايي جداسازي و شناسايي آنها را محدود ميسازد.
ويروسهاي آدنو با قابليت تكثير انتخابي(crADs) امكان هدفگيري انتخابي سلولهاي توموري را فراهم ميكنند، اما كاربرد آنها تاكنون
عمدتاً به شناسايي بر پايه ي بيان پروتئين فلئورسنت بدون امكان جداسازي مؤثر سلولهاي زنده محدود بوده است.
در اين پژوهش، سامانه اي مبتني بر ويروس آدنو مهندسي شده با فناوري اسپايتگ/اسپايكچر طراحي شد كه با استفاده از ميكرودانه هاي مغناطيسي
پوشيده شده با پروتئين اسپايكچر، امكان شناسايي و جداسازي سلولهاي توموري را بدون وابستگي به نشانگرهاي سطحي فراهم ميسازد.
ويروس مهندسي شده (CR-Ad5-S.T-GFP) بهطور انتخابي در سلولهاي توموري داراي فعاليت تلومرازي بالا تكثير يافته و بهصورت همزمان
ژنهاي پروتئين فلئورسنت سبز (GFP) و پپتيد اسپايتگ را تحت پروموترهاي مستقل بيان ميكند. با بهره گيري از برهمكنش اختصاصي بين
اسپايتگ و اسپايكچر، اين سامانه قادر به جداسازي سلولهاي توموري بدون نياز به نشانگرهاي سطحي بوده است.
بدينمنظور، سلولهاي A-549 ، Ca Ski و MCF-7 در نسبتهاي مختلف در يك ميليون جمعيت سلولهاي تكهستهاي خون
محيطي(PBMCs) پخش گرده و توسط فلوسايتومتري مورد تشخيص قرار گرفتند. همچنين جمعيت سلولهاي A-549 در نسبتهاي مختلف
در جمعيت يك ميليوني سلولهاي خوني پخش گشته و پس از جداسازي با ميكرودانههاي مغناطيسي پوشيده از اسپايكچر مورد مطالعه قرار
گرفتند. نتايج حاصل توانايي سيستم ارائه شده را براي تشخيص و جداسازي 80 % سلولهاي توموري در نسبت 1 به 10٬000 داشتهاند. همچنين
شاخص ميزان حداقل تشخيص 35 سلول گزارش گرديد. همچنين با استفاده از اين روش، امكان جداسازي سلولهاي به دام افتاده از ميكرودانه ها
و كشت مجدد آنها مورد بررسي و تاييد قرار گرفت كه اين امر، پتانسيل آن را براي كاربردهاي پسآزمايشگاهي مانند تعيين پروفايل مولكولي
و بررسي حساسيت دارويي نشان ميدهد.
اين روش با تلفيق هدفگيري اختصاصي تومور از طريق ويروسهاي crAD و جداسازي سلولهاي زنده بدون نشانگر، رويكرد نوآورانه اي در
شناسايي CTC ها ارائه ميدهد و با سازگاري با سامانه هاي ميكروسيالي، ابزاري نويدبخش براي پايش تومور و درمانهاي شخصي سازي شده
سرطان محسوب ميشود.
شماره ركورد
234598
گرايش رشته تحصيلي
بيومتريال
دانشكده
مهندسي مواد
دانشگاه
دانشگاه صنعتي اصفهان