تأثير نانوپي-كوماريك اسيد و پي-كوماريك اسيدكنژوگه شده با نانوذره سبز اكسيد روي بر ذخيره سرد، انجماد و لقاح آزمايشگاهي اسپرم بز

توليد بيش از اندازه گونه‌هاي اكسيژن فعال (ROS) در طول ذخيره سرد، انجماد و پس از ذوب بر كيفيت اسپرم و ظرفيت باروري بعدي تأثير مي‌گذارد. به‌تازگي نانوذرات (با ويژگي آنتي‌اكسيداني) به دليل افزايش طول عمر اسپرم و بهبود باروري جنس نر، در دام¬ها مورد توجه زيادي قرارگرفته¬اند. بنابراين هدف از پژوهشكنوني بررسي اثر غني¬سازي رقيق¬كننده¬هاي نگهداري با افزودن پي-كوماريك اسيد (ρ-CA)، نانوذرات پي-كوماريك اسيد (PCNPs)، كلريدروي (ZnCl2 )، نانوذرات اكسيد روي (ZnO-NPs ) و پي-كوماريك اسيد لودشده بر نانوذرات اكسيد روي (ρ-CA-ZnONPs) بركيفيت و توانايي باروري اسپرم بز درشرايط ذخيره سرد و نيز پس از انجماد-يخ‌گشايي بود. ساخت نانوذرات با طيف‌سنجي فرابنفش مرئي، طيف‌سنجي پراكنده انرژي، ميكروسكوپ‌هاي الكتروني روبشي نشر ميداني و طيف‌سنجي فروسرخ تبديل فوريه و پتانسيل زتا تأييد شد. غلظت‌هاي گوناگوني از تيمارها براي تعيين غلظت بهينه از راه ارزيابي تحرك و زنده‌ماني اسپرم به مدت 4 ساعت انكوبه شدند. انزال‌هاي مخلوط شده از 5 بز سانن با رقيق‌كننده نگهداري رقيق شد و با ρ-CA 100 ميكرومولار، PCNPs 01/0 ميكرومولار، ZnCl2 150 ميكروگرم برميلي‌ليتر، ZnO-NPs 1 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر، ZnCl2 150 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر + ρ-CA 100 ميكرومولار، ZnO-NPs 1 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر + PCNPs 01/0 ميكرومولار وρ-CA-ZnONPs 001/0 ميكرومولار غني و در دماي 4 درجه سانتي‌گراد در يخچال به مدت 72 ساعت ذخيره شد. درآزمايش بعدي، مايع مني رقيق شده و غني شده با تيمارهاي بالا به تدريج 1 ساعت تا دماي 4 درجه سانتي‌گراد سرد شد و سپس در نيهاي 5/0 ميلي‌ليتري كشيده شد و در نيتروژن مايع منجمد و نگهداري شدند. فراسنجه‌هاي اسپرمي، توليدگونه‌هاي فعال اكسيژن، سطح ليپيد پراكسيداسيون، توانايي باروري تخمك‌هاي تلقيح شده با اسپرم‌هاي تيمار شده در گروه‌هاي مختلف ارزيابي شدند. يافته‌ها نشان داد كه همه گروه¬هاي تيماري نسبت به گروه كنترل، كيفيت و باروري اسپرم را بهبود بخشيدند. افزودن ρ-CA-ZnONPs و ZnO-NPs +PCNPs به گونه معني¬داري باعث بهبود زنده‌ماني، تحرك و يكپارچگي غشاي پلاسمايي اسپرم در مقايسه با ديگر تيمارها شد (05/0<‎ P). فزون‌بر‌اين، به‌كارگيري ρ-CA-ZnONPsباعث كاهش توليدROS ، پراكسيداسيون ليپيدي و آسيب DNA در مقايسه با ديگرتيمارها شد. رقيق¬كننده¬هاي غني شده با ρ-CA-ZnONPsو ZnO-NPs+ PCNPs قابليت لقاح، توانايي تكوين رويان و كيفيت بلاستوسيست¬ها را در مقايسه با ديگرتيمارها بهبود بخشيدند. اين يافته‌ها توسط تجزيه و تحليل شبكه و تحليل مؤلفه‌¬هاي اصلي تأييد شد. بنابراين، افزودن ρ-CA-ZnONPs به عنوان يك آنتي‌اكسيدن طبيعي به رقيق‌كننده مني بز مي‌تواند دامنه تحمل اسپرم در برابر سرما و پايداري اسپرم پس از نگهداري در شرايط سرد و همچنين پس از ذوب شدن را افزايش دهد.

234534

فيزيولوژي دام و طيور

مهندسي كشاورزي

دانشگاه صنعتي اصفهان