بررسي اثر متفورمين بر روي بيان ژن‌هاي DKK1, GADD45A و MTHFD2 در رده‌هاي سلولي HepG2 و PC-3

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

ايمني شناسي پزشكي

مقدمه: امروزه به‌كارگيري داروهاي موجود در مواردي غير از كاربرد فعلي‌شان به بخش مهمي از مطالعات طراحي دارو تبديل شده است. متفورمين يكي از داروهايي است كه توجهات زيادي را در زمينه درمان سرطان به خود جلب كرده است. نتايج حاصل از مطالعات در اين زمينه با هم در تضاد است، در نتيجه تأثير دقيق متفورمين بر سلول‌هاي سرطاني مشخص نيست. متفورمين پس از ورود به سلول با فعال‌سازي آنزيم AMPK و مسيرهاي پايين‌دست آن منجر به تغيير در متابوليسم سلول‌ها مي‌شود. مسيرهاي تحت‌تأثير AMPK تنها مسيرهاي سركوب‌كنندة تومور نيستند، بلكه اين آنزيم مي‌تواند مسيرهاي دخيل در پيشرفت سرطان را نيز فعال كند. بر همين اساس ما جهت آشكاركردن تأثير متفورمين بر سرطان، اثر آن بر مسيرهاي پايين‌دست AMPK را با اندازه‌گيري بيان ژن‌هاي كليدي دخيل در آن‌ها GADD45A ) ، DKK1 و ( MTHFD2 بررسي كرديم. مواد و روش‌ها: ابتدا از ابزارهاي بيوانفورماتيكي شامل GEO2R وiDEP جهت شناسايي ژن‌هاي تغيير بيان يافته بر اثر تيمار با متفورمين استفاده شد. سپس تأثير دوزهاي مختلف متفورمين ( 5، 10، 20، 40 و80 ميلي‌مولار ) بر تكثير رده‌هاي سلولي PC-3 و HepG2 به مدت 24 ساعت با استفاده از تست CCK-8 بررسي شد. در نهايت تفاوت بيان ژن‌هاي DKK1 , GADD45A و MTHFD2 بين دو گروه كنترل و تيمار با متفورمين به روش RT-qPCR مورد سنجش واقع شد. يافته‌ها: تيمار متفورمين زنده‌ماني سلول‌هاي PC-3 و HepG2 را به‌صورت وابسته به دوز كاهش داد. در سلول‌‌‌هاي HepG2، بيان DKK1 به طور در تمام غلظت‌هاي متفورمين كاهش يافت. در سلول‌هاي PC-3 نيز، متفورمين بيان DKK1 را در غلظت‌هاي بالاتر از 10 ميلي‌مولار افزايش داد. علاوه بر اين، تيمار با متفورمين منجر به افزايش بيان MTHFD2 و GADD45A در هر دو رده‌ي سلولي شد. نتيجه‌گيري: متفورمين با افزايش بيان ژن GADD45A در فعال سازي مسير P53 نقش دارد. مسير P53 يكي از مسير‌هاي مهم در بالادست مكانيسم‌هاي مرتبط با توقف چرخه‌ي سلولي, ترميم DNA و آپوپتوز سلولي مي‌باشد. از اين جهت متفورمين با افزايش بيان GADD45A مي‌تواند به عنوان يك عامل ضد‌تومور در سرطان‌هاي كبد و پروستات عمل كند. اما با اين وجود اثر متفورمين بر بيان تومور ماركرهاي MTHFD2 در هر دو سرطان و DKK1 در سرطان پروستات به بررسي‌هاي بيشتر نياز دارد. كلمات كليدي: متفورمين، GADD45A، DKK1، MTHFD2، بيوانفورماتيك

232869

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

ايمني شناسي

پزشكي

دانشگاه علوم پزشکي کردستان

شهره فخاري، محمدرضا رحماني