عنوان
بررسي اثرات حذف ژن DYRK1B در رده‌ي سلولي MDA-MB-231 بر بقاي سلولي، پاسخ دهي به دارو، تغييرات چرخه‌ي سلولي، متاستاز و تومورزايي
نويسنده اصلي
رشيدي، اسرين
محل تحصيل
دانشگاه علوم پزشكي كردستان
رشته تحصيلي
پزشكي مولكولي
چكيده
مقدمه و هدف: سرطان پستان شايع ترين سرطان در بين زنان در سراسر جهان است و زيرگروه سه گانه منفي (TNBC) پيش آگهي ضعيف و گزينه هاي درماني محدودي دارد. DYRK1B يك كيناز با ويژگي دوگانه است كه چرخه سلولي و سكون سلولي را تنظيم مي‌كند. در حالي كه نقش DYRK1B در چندين سرطان مشخص شده است، نقش آن در TNBC ناشناخته باقي مانده است.
مواد و روش‌ها: در اين مطالعه، ما از CRISPR/Cas9 براي حذف DYRK1B در سلول‌هاي MDA-MB-231، يك مدل سلولي از TNBC، استفاده كرديم و اثرات آن را بر تكثير سلولي، آپوپتوز، تهاجم، مهاجرت، رگزايي و پاسخ به پاكلي‌تاكسل بررسي كرديم.
يافته¬ها: ناك اوت DYRK1B (KO) توسط PCR، Real-time qPCR و توالي سنجي Sanger تاييد شد. سلول‌هاي KO كاهش قابل توجهي در تكثير سلولي، تشكيل كلني، تهاجم و مهاجرت نشان دادند. علاوه بر اين، تغييراتي در سطوح بيان mRNA چندين ژن مربوط به چرخه سلولي، رگزايي و تحرك سلولي مانند CCND1، MCM2، PCNA، CDKN1B، HIF1A، VEGFA و WASF3 در مقايسه با MDA-MB-231 دستكاري نشده (WT)وجود داشت. نتايج ايمونوسيتوشيمي ارزيابي بيان Ki67، به عنوان يك نشانگر تكثير سلولي، نشان داد كه سلول‌هاي KO بيان Ki67 به طور قابل توجهي كمتر از سلول‌هاي WT دارند. همچنين، سلول‌هاي KO افزايش آپوپتوز و حساسيت به مهار تماس را نشان دادند. علاوه بر اين، IC50 براي داروي پاكلي‌تاكسل به طور قابل توجهي در سلول‌هاي KO كاهش يافت.
نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان مي‌دهد كه DYRK1B نقش مهمي در بقا، تكثير، مهاجرت، تهاجم تشكيل كلني و پاسخ دهي به داروي پاكلي‌تاكسل در سلول‌هاي TNBC ايفا مي‌كند و مي‌تواند يك كانديد بالقوه به عنوان يك هدف درماني جديد براي درمان بيماري سرطان پستان سه گانه منفي باشد.
كليد واژه¬ها: پاكلي‌تاكسل، سرطان، سلول ساكن، ويرايش ژنوم، CRISPR/Cas9, DYRK1B
شماره ركورد
232773
شهر محل تحصيل
دانشگاه علوم پزشكي كردستان
گرايش رشته تحصيلي
پزشكي مولكولي
دانشكده
پزشكي
دانشگاه
دانشگاه علوم پزشکي کردستان
استاد راهنما
فردين فتحي، ارنست مارتين فوخت باور