بررسي نمو اوليه، تكوين استخوان ها و ناهنجاري هاي استخواني در آميخته قزل‌آلاي رنگين‌كمان، ماهي آزاد درياي خزر و قزل‌آلاي قهوه‌اي

اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان

شيلات

دكتري

مطالعه حاضر با هدف بررسي قابليت زنده ماندن فرزندان حاصل از آميزش¬هاي متقابل بين ماهي آزاد درياي خزر (Salmo caspius) و قزل-آلاي رنگين¬كمان (Oncorhynchus mykiss) و تأثير القاي تريپلوييدي بر آميخته¬گري و رشد جنيني انجام شد. اين آزمايش شامل شش گروه: قزل¬آلاي رنگين¬كمان (R)، ماهي آزاد درياي خزر (C)، آميخته¬هاي ديپلوييد و تريپلوييد بين قزل¬آلاي رنگين¬كمان ماده و ماهي آزاد درياي خزر نر (3nRC و 2nRC)، آميخته¬هاي ديپلوييد و تريپلوييد بين ماهي آزاد درياي خزر ماده و قزل¬آلاي رنگين¬كمان نر (3nCR و 2nCR) بود. القاي تريپلوييدي توسط شوك حرارتي پس از لقاح انجام شد. درصد تفريخ گروه¬هاي R و C بالاي 90% ،گروه 2nRC (35%) و گروه 3nRC (45%) بود كه نشان¬دهنده بازده بالايي از تأثير القاي تريپلوييدي بر ميزان بقاي آميخته¬ها است، در حالي¬كه جنين¬ها در گروه¬هاي 2nCR و 3nCR به مرحله تفريخ نرسيدند. تعداد كروموزوم¬ها در گروه¬هاي R، C، 2nRC و 3nRC به ترتيب 60، 80، 70 و 102 عدد شمارش شد. زمان قبل از بسته¬شدن بلاستوپور مهم¬ترين نقطه در مراحل جنيني بود كه تلفات زيادي رخ داد. تفريخ در گروه‌هاي R و 3nRC سريع‌تر از C مشاهده شد. بيشترين وزن نهايي و سرعت رشد ويژه در گروه‌هاي R و 3nRC مشاهده شد. بيشترين ميزان ناهنجاري در گروه 2nRC مشاهده شد، درحالي¬كه القاي تريپلوييدي با موفقيت، شيوع لاروهاي بدشكل را در گروه 3nRC كاهش داد. از آناليز مولفه اصلي (PCA)، متغير متعارف (CVA)، فواصل پروكراست و ماهالانوبيس براي تعيين تغييرات مورفومتريك استفاده شد. آناليز PCA هم¬پوشاني آميخته با قزل¬آلاي رنگين¬كمان را نشان داد و آناليز CVA هر سه گونه را به صورت سه جمعيت متمايز گروه¬بندي كرد. بيشترين اختلاف ظاهري در گونه¬هاي ذكرشده مربوط به باله¬هاي پشتي، مخرجي، شكمي، سينه¬اي، سرپوش آبششي، دهان و چشم در دوران لاروي است. روند تكوين غضروف-استخوان با روش رنگ¬آميزي آلسيان بلو-آليزارين رد بررسي شد. لاروهاي دو روزه (R, C, 3nRC) كاملاً غضروفي بودند. آغاز استخواني شدن در قسمت جمجمه و تمامي باله¬ها به ترتيب در گروه‌هاي R، 3nRC و C مشاهده شد. همچنين اين مطالعه به صورت مجدد در دانشگاه گوتينگن آلمان به منظور انجام مطالعات بيان ژن انجام شد كه شامل 5 گروه: قزل¬آلاي رنگين¬كمان (R)، قزل¬آلاي قهوه¬اي (Salmo trutta) (B)، آميخته ديپلوييد و تريپلوييد (القاي شوك به دو روش مختلف) بين ماهي قزل¬آلاي رنگين¬كمان ماده و قزل¬آلاي قهوه¬اي نر (2nRB, 3nRB1, 3nRB2) بود. در 3nRB1 شوك حرارتي º C28، به مدت 10 دقيقه، 10 دقيقه پس از لقاح و 3nRB2 از شوك حرارتي ºC 26، به مدت 20 دقيقه، 25 دقيقه پس از لقاح استفاده شد. بيان چهار ژن مرتبط با رشد و ايمني شامل (GH، IGF-I، IGF-II و TLR3) و دو ژن خانه¬دار (-actinβ و Elongation factor1α) در چهار زمان تكاملي مختلف (تخم چشم¬زده، يك روز قبل از تفريخ، لارو يك روزه و لارو 21 روزه) مورد بررسي قرار گرفته شد. هر چهار ژن هدف (GH، IGF-I، IGF-II و TLR3) در همه مراحل نمونه برداري¬شده (از مرحله چشم¬زدگي تخم تا لارو 21 روزه) بيان شدند. بيان ژن GH و IGF-I در گروه B (قزل¬آلاي قهوه¬اي) در تمام زمان¬هاي نمونه¬برداري به طور معني‌داري بيشتر از ساير گروه¬ها بود. همچنين بين گروه¬هاي 3nRB1 و 3nRB2 با گروه R اختلاف معني¬داري مشاهده نشد. بيشترين ميزان بيان ژن IGF-I در تمامي گروه¬ها در لاروهاي 21 روزه و IGF-II در زمان جنيني مشاهده شد. بيشترين ميزان بيان ژن TLR3 در آميخته¬ها (گروه-هاي 2nRB، 3nRB1 و 3nRB2) و كم¬ترين آن در قزل¬آلاي قهوه¬اي (B) اندازه¬گيري شد. به‌طور كلي، با توجه به افزايش بقاي آميخته¬هاي تريپلوييد و كاهش ناهنجاري در آن‌ها و شناسايي مراحل بحراني جنيني، با پژوهش¬هاي بيشتر در زمينه رشد و مقاومت به بيماري، اين آميخته مي¬تواند به مرحله توليد تجاري برسد.

229664

تكثير و پرورش آبزيان

مهندسي منابع طبيعي

دانشگاه صنعتي اصفهان