عنوان
بررسي بيان ژن‌هاي فرار از ايمني اسينتوباكتر بوماني در كشت همزمان با سلول‌هاي تك‌هسته‌اي خون محيطي انسان
مقطع تحصيلي
كارشناسي ارشد
چكيده
گونه‌هاي باكتري اسينتوباكتر به دليل توانايي آن‌ها براي بقاء در محيط بيمارستان و طيف وسيعي از سطوح به عنوان يك ميكروارگانيسم مهم بيمارستاني شناخته شده‌اند. عفونت‌هاي انساني ناشي از گونه‌هاي اسينتوباكتر شامل پنومونيه، اندوكارديت، مننژيت، عفونت‌هاي پوستي و زخم، عفونت‌هاي دستگاه ادراري و باكتريمي است. از ويژگي‌هاي اسينتوباكتر بوماني، وجود عوامل حدتي است كه علاوه بر بيماريزايي، در فرار از سيستم ايمني ميزبان نقش موثري ايفا مي‌كنند. از جمله اين عوامل، پروتئين A غشاي خارجي (OmpA) است كه نقش كليدي در تنظيم چسبندگي، تهاجم، تشكيل بيوفيلم و پاسخ ايمني ميزبان ايفا مي‌كند. پروتئين ديگر Bap مي‌باشد كه در شكل‌گيري بيوفيلم و مقاومت در برابر بخش همورال سيستم ايمني نقش دارد. هدف از اين پژوهش بررسي بيان ژن‌هاي فرار از ايمني bap و ompA قبل و بعد از كشت همزمان با سلول‌هاي تك‌هسته‌اي خون محيطي انسان (PBMC) مي‌باشد تا رفتار بياني اين ژن‌ها پس از مواجهه با سلول‌هاي ايمني مشخص گردد.
به همين منظور ابتدا اسينتوباكتر بوماني جداشده از نمونه‌هاي تنفسي بيماران تهيه گرديد و با سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي و مايع رويي حاصل از آن كشت داده شد. پس از 24 ساعت تعداد و زنده‌ماني سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي، CFU، توليد سايتوكاين‌هاي التهابي و ضدالتهابي، بيان ژن‌ها و توليد بيوفيلم بررسي گرديد.
نتايج اين پژوهش نشان داد كه تكثير سلول‌هاي تك‌هسته‌اي خون محيطي در كشت همزمان با باكتري نسبت به گروه كنترل كاهش معنادار دارد. زنده‌ماني سلول‌ها در اين گروه نيز نسبت به گروه سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي بدون باكتري كاهش معناداري داشت. تغيير معناداري در CFU در گروه كشت همزمان باكتري و سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي و گروه كشت همزمان باكتري با مايع رويي سلول‌ها مشاهده نشد. در گروه كشت همزمان باكتري و سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي نسبت به گروه سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي به تنهايي، افزايش توليد سايتوكاين TNF-α و كاهش توليد IL-6 و IL-10 مشاهده شد. بيان ژن bap در گروه كشت همزمان باكتري و سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي و مايع رويي نسبت به قبل از كشت با كاهش معنادار همراه بود. در حاليكه بيان ژن ompA دچار تغيير معناداري در بين گروه‌ها نشد. نمونه‌هاي مورد آزمايش در هر دو حالت قبل و بعد از كشت همزمان، توليدكننده قوي بيوفيلم بودند و علي‌رغم افزايش توليد بيوفيلم پس از كشت همزمان، اين افزايش معنادار نبود.
مجموع نتايج حاصل از اين پژوهش نشان داد كه اسينتوباكتر بوماني در كشت همزمان با سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي باعث ايجاد پاسخ التهابي شده است كه در نتيجه آن تكثير سلولي رخ مي‌دهد ولي به دليل التهاب ايجادشده، زنده‌ماني سلول‌ها كاهش يافته است. همچنين احتمالا اين پاسخ التهابي باعث كاهش بيان ژن bap مي‌گردد، اگرچه اين كاهش بيان در تعداد باكتري و تشكيل بيوفيلم توسط آن تاثيري ندارد.
شماره ركورد
227998
دانشگاه
دانشگاه اصفهان
رشته تحصيلي
ميكروبيولوژي - ميكرو ارگانيسم هاي بيماري زا
استاد راهنما
بابك بيك زاده