بهينه‌سازي و توسعه زيست حسگر ايمني الكتروكمي¬لومينسانس به منظور رديابي نوري هورمون بارداري

كارشناسي ارشد

الكتروكمي¬لومينسانس (ECL) تكنيك بسيار پيشرفته براي بررسي آناليت زيستي مي¬باشد. اين تكنيك براي جداسازي كامل منبع ورودي (الكتريسيته) و سيگنال خروجي (نور) است. هدف از اين مطالعه توسعه و ساخت اجزا كيت ECL-HCG جهت تشخيص كمي هورمون بارداري (HCG)، با استفاده از حسگر زيستي نوري الكتروكمي¬لومينسانس(ECL) مبتني بر نانوذرات مغناطيسي بر پايه سلول بسته دوقطبي طراحي گرديد. در واقع اين كيت دو جز اصلي نانوذرات آهن پوشش داده شده با طلا و متصل شده به آنتي بادي آلفا HCG و آنتي بادي بتا HCG متصل به بيوتين را دارد. در نهايت كيت HCG در دستگاه سنجش الكتروكمي¬لومينسانس مورد ارزيابي قرار گرفت. از نتايج مشخصه¬يابيXRD براي Fe3O4 دريافتيم كه پيك هاي قوي در زوايـه35/60 درجه و منطبـق بـر كـارت اســتاندارد شــماره 19-0629 Fe3O4 مي¬دهد، همچنين نتايج DLS و Zeta potential براي نانوذراتCitrate -Fe3O4 و Fe3O4 به ترتيب قطر هيدروديناميكي 39.8±162.8نانومتر و 53.8 ±169.3نانومتر، همچنين پتانسيل زتا برابرmv 7/39- و پتانسيل زتا برابرmv 6/40- نشان مي¬دهد. همچنين نتايج UV-VIS براي مشخصه¬يابي نانوذرات Fe3O4-Au و Fe3O4 نشان داد كه در حدود 580 تا 600 نانومتر Fe3O4-Au داراي پيك مي¬باشد اما Fe3O4 در اين محدوده هيچ پيكي وجود نداشت. از نتايج مشخصه¬يابي ICP-MS براي غلظت عناصر Fe3O4-Au استفاده شد و نشان داد 622/87 ppm طلا و 742/24 ppm آهن در محلول وجود داشت. همچنين نتايج FTIR براي مشخصه¬يابي Fe3O4 ، Fe3O4-Au ، Fe3O4-Au – αHCG و بيوتين- βAbنشان دهنده وجود پيك آهن خالص و پيك هاي كربوكسيليك براي پوشش دهي طلا و پيك هاي گروه آميدي براي پيوند كربوكسيل نانوذرات و گروه آمين آنتي بادي آلفا و اتصال گروه‌هاي كربوكسيل بيوتين به گروه‌هاي N-H آنتي‌بادي بتا مي¬باشد. همچنين نتايج SDS-PAGE براي مشخصه¬يابي Fe3O4-Au – αHCG و بيوتين- βAb نشان دهنده وجود انتي بادي متصل شده به نانوذرات و بيوتين به ترتيب در باند هاي KD 73 و KD 75 مي¬باشد و در نهايت نتايج Bradford براي مشخصه¬يابي غلظت Fe3O4-Au – αHCG و بيوتين- βAb به ترتيب µg/mL 1622 و µg/mL 89.75 بود. طبق متولوژي انجام شده كيت ساخته شده توسط ما، قابليت دارد كه به عنوان ابزار تشخيص دهنده آناليت هاي HCG ، و براساس تست امكان شناسايي و ارائه سيگنال¬هاي نوري را با كيفيت قابل اندازه-گيري داشت.

227625

دانشگاه اصفهان

مهندسي پزشكي-بيومواد

محسن صراف