بررسي اثر آنتي¬باكتريال سلول¬هاي بنيادي مشتق شده از بافت چربي (hADSCs) بر باكتري اشريشياكلاي ATCC: 25922 و نقش هپسيدين در آن

رشت

چكيده: مقدمه: چندين مطالعات نشان داده كه سلول¬هاي بنيادي داراي اثرات آنتي¬باكتريال بوده و اين اثرات بواسطه ترشح پپتيدهاي آنتي¬ميكروبيال نظير LL-37 مي¬باشد. با توجه به اينكه اثر آنتي¬باكتريال سلول¬هاي بنيادي مشتق شده از بافت چربي انساني (hADSCs) به واسطه هپسيدين بررسي نشده، هدف ما از اين مطالعه تعيين اثر آنتي¬باكتريال سلول¬هاي بنيادي مشتق شده از بافت چربي انساني (hADSCs) بر باكتري E.coli ATCC:25922 و نقش هپسيدين در آن بود. مواد وروش¬ها: hADSCs جداسازي و كشت داده شد و با اندازه گيري ماركرهاي سطحي به روش فلوسايتومتري و تمايز آنها به آديپوسيت و استئوبلاست تأييد شدند. از باكتري E.coli ATCC:25922 و با رقيق كردن سريالي، سوسپانسيوني حاوي CFUs/ml 300تهيه شد و در پليت¬هاي 24 چاهك در مجاورت سلول¬هاي بنيادي به مدت 6 ساعت در دماي 37 درجه انكوبه شد. سوپرناتنت هر يك از چاهك¬ها به عنوان(CM) Conditioned medium در نظر گرفته شد وميزان رشد باكتري در گروه CM ، گروه كنترل (فقط باكتري )وگروه هپارين(داراي هپارين) اندازه گيري شد. بيان ژن هپسيدين در سلول ¬هاي بنيادي با استفاده از روش Real-Time PCR ارزيابي شد .براي آزمون آماري از آناليز واريانس يك طرفه (One-Way ANOVA) ، تست تكميلي Tukey و آزمون Kruskal-Wallis استفاده شد. P<0/05 به عنوان معيار معني داري در نظر گرفته شد. نتايج: ميزان رشد باكتري اي كولاي براساس CFU/ml در گروه كنترل 104×(2/173±2/1494)، گروه كانديشن مديوم 104×(9/77±7/242)وگروه هپارين 104×(104±3/533)بود. رشد باكتري در گروه كانديشن مديوم نسبت به گروه كنترل كاهش معناداري) 05/0 (P< داشت.ميزان بيان ژن هپسيدين در گروه كانديشن مديوم به 16/3 برابر افزايش يافت. ميزان بيان ژن هپسيدين در حضور هپارين كاهش يافته ومجدداً به حدود سطح اوليه بازگشت. همچنين هپارين ميزان رشد باكتري را افزايش داد ولي از نظر اماري معني دار نبود . نتيجه گيري: نتايج ما نشان داد كه hADSCs داراي اثرات آنتي¬باكتريال بر باكتري اي كولاي مي¬باشد. همچنين بيان ژن هپسيدين توسط سلول¬هاي فوق در حضور باكتري افزايش معني داري نشان داد. هپارين توانست ميزان بيان ژن هپسيدن را كاهش و رشد باكتريهارا افزايش دهد ولي اين افزايش از نظر آماري معني¬دار نيست. به نظر مي¬رسد كه علاوه بر هپسيدين احتمالاً فاكتورهاي ترشحي ديگري مي¬بايست در اثرات آنتي¬باكتريال hADSCs نقش داشته باشند. واژگان كليدي: سلول¬هاي بنيادي، آنتي¬باكتريال، اشريشياكلاي، هپسيدين

212671

علوم پزشكي گيلان