ساخت وكتور بياني كد كننده microRNA-107 با اثرات بالقوه ضد آلزايمري

رشت

مقدمه: بيماري آلزايمر يكي از بيماري هاي در حال رشد در دنياست. علي‌رغم پيشرفت در حوزه پزشكي، درمان‌هاي موجود قادر به توقف تخريب سلول‌هاي عصبي نيستند و صرفا باعث بهبود علائم بيمار مي‌شوند. امروزه مطالعات زيادي درباره‌ي miRNA‌ها به عنوان راهكار درماني نوين بيماري‌ آلزايمر انجام گرديده است. miRNA‌ها، توالي‌هاي غيركدكننده‌ي 25-18 نوكلئوتيدي هستند كه بيان ژن را پس از رونويسي از طريق مهار ترجمه يا القاي تجزيه كنترل مي‌كنند و نقش تنظيمي در سلول ايفا مي‌كنند. از ميان miRNA هاي مرتبط با بيماري آلزايمر، miRNA-107 استثناست زيرا سطح اين miRNA حتي در مراحل اوليه بروز بيماري كاهش قابل توجهي دارد. با كاهش سطح miRNA-107 در طي فرآيند ايجاد آلزايمر، سطح BACE1 افزايش يافته و باعث افزايش ساخت پلاك هاي بتا آميلوئيدي مي شود و از اين طريق در تسريع و پيشرفت بيماري اثر مي گذارد. اين مطالعه در راستاي طراحي و ساخت وكتور نوتركيب كد كننده miRNA-107 مي باشد. مواد و روش ها: با استفاده از بانك اطلاعات ژني miRbase و NCBI، ژن كدكننده‌ي miRNA-107 طراحي گرديد و با كمك نرم‌افزار MFEprimer3.1 پرايمرهاي مورد نياز طراحي و اين ژن به روش assembly PCR ساخته شد. در ادامه با استفاده از واكنش هاي هضم آنزيمي و ليگاسيون، اين ژن در پلاسميد pcDNA3.1(+) الحاق گرديد و با استفاده از روش شوك حرارتي، پلاسميد ساخته شده در باكتري E.coli DH5-α ترانسفورم شد. در نهايت پس از تاييد اوليه وجود ژن مورد نظر با استفاده از تكنيك هاي Colony PCR و هضم آنزيمي، در پلاسميد استخراج شده از باكتري، به منظور تاييد نهايي توالي يابي شد. نتايج: وجود ژن طراحي شده در پلاسميد با استفاده از تكنيك هاي Colony PCR و هضم آنزيمي تاييد شد. نتايج بدست آمده از توالي يابي نيز حضور اين ژن در وكتور نوتركيب را تاييد كرد. نتيجه گيري: باتوجه به توليد وكتور نوتركيب كدكننده ي miRNA-107، مي توان در مطالعات بعدي ورود اين وكتور به داخل سلول هاي عصبي و اثرات ناشي از بيان آن در مدل هاي برون تن و درون تن بيماري آلزايمر مورد بررسي قرار گيرد.

204855

علوم پزشكي گيلان