طراحي و ساخت نانو كامپوزيت مغناطيسي جديد زيست سازگار اصلاحشده با دوپامين و بررسي خاصيتهاي بيولوژيكي جهت جداسازي و خالصسازي نمونههاي طبيعي و بيولوژيكي

كارشناسي ارشد

خالص سازي و جداسازي پروتئين ها با هدف دست يافتن به حجم زيادي از پروتئين خالص به منظور استفاده از آن در مراحل بعدي است. آنزيم خالص شده در اين كار آلفا آميلاز است. در شيمي و زمينه هاي بيولوژيكي، از آنزيم ها براي شروع و ادامه واكنش ها به عنوان كاتاليزور بيولوژيكي استفاده شده است. اين كاتاليزورها در مقايسه با كاتاليزورهاي شيميايي مزاياي بيشتري دارند . پروتئينهاي آلفا آميلاز )آلفا- 1 و 4 گلوكان- 4 -گلوكانوهيدرولاز( به عنوان كاتاليزورهاي بيولوژيكي به دليل توانايي آنها در هيدروليز نشاسته، در واكنش هاي آنزيمي مورد توجه بسياري قرار گرفتند. پروتئين هاي آلفا آميلاز با ساختار سه بعدي قادر به نقش مهمي در صنايع غذايي، نساجي، باليني و دارويي و شيمي هستند و ميتوانند از منابع گياهي و حيواني مانند شير، جو، برنج، قارچ و تيلاپيا توليد شوند. تاكنون روش هاي مختلفي براي خالص سازي آلفا آميلاز مطرح شده است كه داراي معايبي بودند و بازده خلوص بالايي را نداشتند. در اين تحقيق، يك نانوكامپوزيت جديد بر پايه نانوذرات مغناطيسي عامل دار شده توسط دوپامين گزارش شده است. سه نانوكامپوزيت مغناطيسي اصلاح شده توسط دوپامين با طول و نوع پيوند دهنده هاي مختلف ارائه شد. در نانوكامپوزيت هاي مغناطيسي ذكر شده براي جداسازي پروتئين آلفا آميلاز از شير تازه گاو استفاده شد. همه نانوكامپوزيت هاي مغناطيسي با استفاده از تجزيه و تحليل با استفاده از تجزيه و تحليل پراش پرتو ايكس، طيف سنجي پراش انرژي پرتو ايكس، طيف سنجي تبديل فوريه اشعه مادون قرمز، ميكروسكوپ الكتروني روبشي نشر ميداني، طيف مقدار مغناطش اشباع مشخص و بررسي شد، مشخص و بررسي شدند. براي بررسي خلوص، الكتروفورز ژل پلي آكريل آميد سديم دودسيل سولفات، الكتروفورز ژل ايزواكتروفوكوسينگ يك بعدي و اندازه گيري فعاليت آلفا آميلاز استفاده شد.با توجه به عواملي مانند عملكرد خالص سازي و غلظت پروتئين جدا شده توسط هر يك از نانوكامپوزيت مغناطيسي، مي توان نتيجه گرفت كه طول پيوند دهنده ها نقش مهمي در جداسازي پروتئين آلفا آميلاز دارد. بر اساس نتايج، بهترين بازده 83 / 49 % و فاكتور خالصسازي پروتئين 11 / 40 ميباشد. اين نتايج مربوط به اتصال دهنده با طول طولانيتر، 1،4 -بوتان دي ال دي گلايسيديل اتر بود، زيرا انعطاف پذيري تركيب را بهبود دهند.

195510

دانشگاه علم و صنعت ايران

نانوشيمي

دكتر علي ملكي